2x Plus Mix PCR

Описание и отзывы

Характеристики

Описание продукта:
Плюс 2х микс-это премированный, готовый к использованию раствор, содержащий плюс DNA Polymerase, dNTPs, MgCl₂И буфера реакции при оптимальных концентрациях для эффективного усиления шаблонов DNA PCR. Для подготовки окончательного ПЦР добавляются только праймеры и шаблон DNA. Плюс микс способствует высокому воспроизводимому ПЦР, уменьшая риск ошибки пипетки, просчета и загрязнения. Это также способствует более высокой чувствительности, добавляя усилитель.

Taq Plus, смесь taq и pfu polymerase, смешивает processivity taq с высокой точностью pfu. Таким образом, это специально разработанное Taq plus позволяет усилить точность higer и более длинные шаблоны, чем одноферментные составы. Это также лучший выбор для усиления сложного шаблона, такого как шаблон GC-rich. И подходит в качестве прямой замены для обычной полимеразы Taq в большинстве применений. Кроме того, использование Taq plus приводит к 3 и острой;-dA overhangs PCR продукции, которая может быть использована в TA clone.

Особенности
Удобный: Добавляются только праймеры и шаблон DNA при подготовке окончательного PCR
Высокая эффективность: Экономит ваше время, упрощая процесс
Воспроизводимости результатов: Уменьшение риска ошибок в пипетках, просчетов и загрязнения

Приложений
Длинный PCR с высокой точностью
Высокая производительность PCR для сложных шаблонов
Высокая пропускная способность PCR для сложных шаблонов
Поколение PCR продуктов для TA клонирования

Определение единицы
Одна единица определяется как количество фермента, необходимого для катализирования включения 10 нм dNTPs в кислотно-нерастворимой форме в течение 30 минут при 70 °C с использованием в качестве подложки hering спермы.

2 ×pcr плюс микс
20 мм Tris-HCl (pH 8,0), 100 мм KCl , 3 мм MgCl₂, 400 мм dNTPs, 0,1 U/μl плюс DNA полимераза, бромфенил синий, другой усилитель и стабилизирующий агент
Хранить при температуре-20 °C.

Основные шины для легкового автомобиля протокол
1. Добавьте следующие компоненты в стерильную 50 мкл микроцентрифуговую трубку, сидящую на льду:

 

Компоненты	Объем	Конечной концентрации
2 ×pcr плюс микс	25 мкл	1 ×
Смесь грунтовки (по 10 мкм каждый)	4 мкл	0,4 мкм каждый
Шаблон ДНК	1-10 мкл	N/a
Нуклеиназы-туалетная вода	До 50 мкл	N/a

2. Смешать содержимое трубки и наложения с 50 мкл минерального или силиконового масла.
3. Пробки и центрифуги для краткого сбора содержимого на дно.
4. Инкубационные трубки в тепловом циклоне при 94 °C в течение 3 минут, чтобы полностью обойти шаблон.
5. Выполните 25-35 циклов усиления ПЦР следующим образом:

 

Шаг	Температура	Продолжительность
Денатурируют	94 °C	45С
Отжиг	55 °C	30С Отсчетом
Расширение	72 °C	1 мин 30 s

6. Инкубация для дополнительного 10 мин при 72 °C и поддерживать реакцию при 4 °C. Образцы могут храниться при температуре-20 °C до использования.

 

7. Анализируйте продукты усиления путем электрофореза agarose gel и визуализируйте с помощью окрашивания бромидом ethidium. Используйте соответствующие стандарты молекулярной массы.

Примечания относительно Велоспорт условия

Начальная денатурация может быть выполнена с интервалом 1-5 мин при 95 °C в зависимости от содержания GC шаблона.

Оптимальная температура отжига на 5 °C ниже температуры плавления грунтовки-температуры дуплекса DNA. Если получены неспецифические продукты ПЦР, оптимизация температуры отжига может быть выполнена путем повышения температуры шаг на 1-2 °C.

Количество циклов ПЦР зависит от количества шаблона в смеси реакции и от ожидаемого выхода продукта ПЦР. 25-35 циклов обычно достаточны для большинства реакций ПЦР. Низкое количество пускового шаблона может потребовать 40 циклов.

Время последнего шага расширения может быть увеличено для амплитудов, которые будут клонированы в векторов T/A.

 

-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

 

Реагенты Dongsheng Biotech PCR ищут дистрибьюторов и предоставляют услуги OEM

Dongsheng Biotech предлагает различные серии продуктов, которые помогут вам достичь успеха PCR. Для ферментов, нашей Taq полимеразе, HS Taq DNA Polymerase, FS Taq DNA Polymerase, Pfu DNA Polymerase и Fusion Pfu DNA Polymerase обеспечивают высокую точность, эффективность, чувствительность PCR производительности. У нас также есть длинная Taq DNA Polymerase для долгой производительности PCR.